Filtrowanie peptydów
Filtrowanie peptydów w celu ich sterylizacji i usunięcia zanieczyszczeń mechanicznych po produkcji i rekonstytucji.
🧪 Wymagane materiały
-
- Zrekonstruowany peptyd: Peptyd w formie płynnej (zazwyczaj rozpuszczony w wodzie bakteriostatycznej lub sterylnej soli fizjologicznej).
- Sterylna strzykawka: Pojemność dopasowana do objętości roztworu (np. 3 ml lub 5 ml). Najlepiej ze złączem wkręcanym, które zapobiega zerwaniu filtra pod wpływem ciśnienia.
- Filtr strzykawkowy o porowatości 0.22 µm: Służy on do sterylizacji (zatrzymuje bakterie).
Ważne: Używaj wyłącznie filtrów oznaczonych jako Low Protein Binding (nisko wiążące białka), takich jak membrany PES (polieterosulfon) lub PVDF. Unikaj filtrów nylonowych, ponieważ peptyd osadzi się na membranie i stracisz dużo substancji aktywnej.
-
-
- Sterylna fiolka docelowa: Pusta, sterylna szklana fiolka z gumowym korkiem, najczęście jest to wkład do pena.
- Dwie sterylne igły: Jedna do pobrania roztworu, druga (opcjonalnie) do nałożenia na filtr, jeśli przebijasz korek nowej fiolki.
- Waciki nasączone alkoholem: Do dezynfekcji.
-
📝 Instrukcja krok po kroku
Krok 1: Przygotowanie i dezynfekcja
Rozpocznij od dokładnego umycia rąk i założenia jednorazowych rękawiczek. Zdezynfekuj blat roboczy alkoholem. Przetrzyj wacikiem nasączonym alkoholem gumowe korki zarówno fiolki z rozpuszczonym peptydem, jak i sterylnej, pustej fiolki docelowej. Poczekaj, aż alkohol odparuje.
Krok 2: Pobranie roztworu peptydu
Nałóż pierwszą igłę na strzykawkę. Przebij korek fiolki z peptydem i powoli zaciągnij cały płyn do strzykawki. Postaraj się zaciągnąć odrobinę powietrza na sam koniec – pomoże to przepchnąć resztki płynu przez filtr (minimalizując tzw. martwą objętość filtra).
Krok 3: Montaż filtra strzykawkowego
Zdejmij igłę ze strzykawki (ostrożnie, aby nie dotknąć końcówki strzykawki). Otwórz sterylne opakowanie filtra strzykawkowego 0.22 µm i nakręć go na strzykawkę. Upewnij się, że filtr jest zamocowany szczelnie.
Krok 4: Przygotowanie do filtracji
Jeżeli Twoja fiolka docelowa jest zamknięta gumowym korkiem, na końcówkę filtra strzykawkowego nałóż nową, sterylną igłę.
Krok 5: Właściwa filtracja (Najważniejszy krok)
Przebij zdezynfekowany korek pustej fiolki igłą przymocowaną do filtra.
Zacznij bardzo powoli i równomiernie naciskać tłok strzykawki. Płyn będzie przechodził przez membranę 0.22 µm i skapywał do nowej fiolki.
Uwaga na ciśnienie: Peptydy są delikatne i wrażliwe na siły ścinające. Zbyt mocne ciśnienie może uszkodzić strukturę peptydu (powodując jego degradację lub pienienie), a także spowodować pęknięcie membrany filtra, co zniweczy proces sterylizacji. Krople powinny powoli i swobodnie spływać do fiolki.
Gdy cały płyn przejdzie, wciśnij tłok do końca, aby przepchnąć resztki płynu uwięzione w filtrze za pomocą bańki powietrza, którą zaciągnąłeś w Kroku 2.
Krok 6: Zakończenie
Wyciągnij igłę z korka. Twoja docelowa fiolka zawiera teraz przefiltrowany, sterylny roztwór peptydu wolny od bakterii i cząstek stałych. Oznacz fiolkę datą i nazwą substancji, a następnie przechowuj ją w lodówce (zgodnie z zaleceniami dla danego peptydu). Zużyty filtr, strzykawkę i igły wyrzuć do odpowiedniego pojemnika na odpady medyczne.
Nowe
